Bromek etydyny

Niebezpieczeństwo H302, H330, H341, H302 : Działa szkodliwie po połknięciu
H330 : Wdychanie
grozi śmiercią H341 : Podejrzewa się, że powoduje wady genetyczne (wskazać drogę narażenia, jeżeli definitywnie udowodniono, że żadna inna droga narażenia nie powoduje takiego samego zagrożenia)

Dyrektywa 67/548 / EWG

T + Symbole :
T + : Bardzo toksyczny

Zwroty R :
R22 : Działa szkodliwie po połknięciu.
R26 : Działa bardzo toksycznie przez drogi oddechowe.
R68 : Możliwość nieodwracalnych skutków.
R36 / 37/38 : Działa drażniąco na oczy, drogi oddechowe i skórę.

Zwroty S :
S26 : Zanieczyszczone oczy przemyć natychmiast dużą ilością wody i zasięgnąć porady lekarza.
S28 : Zanieczyszczoną skórę natychmiast przemyć obficie… (odpowiednie produkty wskazane przez producenta).
S45 : W przypadku awarii lub jeżeli źle się poczujesz, niezwłocznie zasięgnij porady lekarza - jeżeli to możliwe, pokaż etykietę.
S36 / 37 : Nosić odpowiednią odzież ochronną i rękawice.

Zwroty R : 22, 26, 36/37/38, 68,
Zwroty S : 26, 28, 36/37, 45,

Transport

2811

Kod Kemlera:
66 : substancja bardzo toksyczna
Numer UN :
2811 : MATERIAŁ TRUJĄCY ORGANICZNY STAŁY, INO
Klasa:
6.1
Etykieta: 6.1 : Substancje toksyczne Opakowanie: Grupa pakowania I : substancje bardzo niebezpieczne;

Jednostki SI i STP, chyba że określono inaczej.

Bromek etydyny (synonim: homidium rzadziej Novidium , babidium lub R & D, 1572 ), w skrócie BET , BET lub EtBr , jest organiczny związek aromatyczny o czwartorzędowe sole amoniowe o Wzór chemiczny C 21 H 20 BRN 3 . Jest to produkt toksyczny i mutagenny stosowany jako lek i marker molekularny.

Chemia

Schematycznie cząsteczka składa się z rdzenia fenantrydyna podstawiony obustronnie przez dwie funkcje aminy , N- etylowane i fenyl na atomie na węglu 6.

Historyczny

Etydyny został opracowany w 1950 roku jako lek do walki w Afryce przeciwko infekcjom bydła z powodu świdrowców (odpowiedzialny za śpiączki ), jest dziś nadal stosowane w tym wskazaniu. Do leczenia zakażonych zwierząt stosuje się dawkę 1 mg · kg -1 .
Ta dawka ma również działanie profilaktyczne , aby zapobiec infekcji przez trzy miesiące.

Już w 1965 roku ujawniono skuteczność bromku etydyny w znakowaniu DNA . Po raz pierwszy został użyty w 1973 roku przez Sharp i wsp. Do wykrywania fragmentów DNA po elektroforezie .

Zastosowanie weterynaryjne

Bromek etydyny jest solą stosowaną przeciwko pasożytom Trypanosoma congolense i Trypanosoma vivax , środkom śpiączki, które zakażają głównie bydło; jednak chlorek etydyny, bardziej rozpuszczalny niż bromek ( 200 g · L -1 w porównaniu z 50 g · L -1 ), jest korzystny, ponieważ umożliwia przygotowanie bardziej stężonych roztworów, a zatem dostarcza te same dawki przy zmniejszonej objętości.

Zastosowanie w biologii molekularnej

Bromek etydyny jest środkiem interkalacyjnym powszechnie stosowanym jako marker kwasu nukleinowego w laboratoriach biologii molekularnej .

Po wystawieniu na działanie ultrafioletowego promieniowania , to fluorescencję o pomarańczowo-czerwony, 20 razy bardziej intensywna gdy są związane z DNA . Efekt ten wynikałby ze wzrostu hydrofobowości środowiska, a nie ze usztywnienia pierścienia benzenowego , który nie byłby umiejscowiony pomiędzy parami zasad .

Najczęstszym zastosowaniem jest barwienie żeli przeznaczonych do separacji fragmentów DNA metodą elektroforezy . BEt można mieszać z agarozą podczas przygotowywania żelu lub żel można zanurzyć w roztworze BEt (zwykle na 20-30 minut) po zakończeniu migracji. W obu przypadkach końcowe stężenie BEt wynosi około 0,5 μg · ml -1 (stężenie roztworu podstawowego wynosi zwykle 10 mg · ml -1 ). W przypadku elektroforezy na żelu poliakrylamidowym , zabarwienie może odbywać się tylko po przejściu, zakład hamujący polimeryzację z akryloamidu .

Bromek etydyny umożliwia również zabarwienie RNA poprzez umieszczenie się między zasadami krótkich regionów komplementarnych. Jednakże, ponieważ większość RNA nie jest dwuniciowych, przy równych masach barwienie RNA jest znacznie mniej intensywne niż DNA.

Toksyczność, ekotoksyczność

Bromek etydyny, mający zdolność wiązania się z DNA, ma silne działanie mutagenne , a także może być rakotwórczy i teratogenny . Jednak żadne badanie nie wykazało działania rakotwórczego.

We Francji Krajowy Instytut Badań i Bezpieczeństwa oferuje substytut jodku propidyny .

bezpieczeństwo

Bromek etydyny jest niebezpieczną substancją chemiczną, z którą należy obchodzić się ostrożnie.
Zawierające go pozostałości należy usuwać jako odpady niebezpieczne .

Zobacz także: sekcja „kolumna filtracyjna” artykułu w kolumnie biologii molekularnej .

Zwroty ryzyka i zwroty wskazujące środki ostrożności

Wskazania na etykietach zalecają przy obchodzeniu się z BEt noszenie rękawic winylowych lub nitrylowych . W rzeczywistości lateks jest porowaty dla BEt, który przechodzi przez niego w mniej niż 5 minut.

Uwagi i odniesienia

obliczona masa cząsteczkowa od „ atomowych jednostek masy elementów 2007 ” na www.chem.qmul.ac.uk .
Wpis numeru CAS "1239-45-8" do chemicznej bazy danych GESTIS IFA (niemiecki organ odpowiedzialny za bezpieczeństwo i higienę pracy) ( niemiecki , angielski ), dostęp 18 listopada 2008 (wymagany JavaScript)
(w) Stevenson P Sones KR Gicheru MM, EK Mwangi., „ Porównanie chlorku izometamidium i bromku Homidium jako leków profilaktycznych na trypanosomatozę u bydła w Nguruman, Kenia. » , Acta Trop. , vol. 59 N O 21995, s. 257–258 ( PMID 7676909 )
MJ Waring, Complexformation between ethidiumbromide and nucleicacids, Journal of Molecular Biology , 1965 13 (1): 269-282.
Phillip A. Sharp, Bill Sugden, Joe Sambrook, Detection of two restiction endonuclease activity in Haemophilus parainfluenzae using analytical agarose-ethidium bromide electrophoresis, Biochemistry , 1973 12 (16): 3055–3063
Rousselin X, Dayan-kenigsberg J, Pléven C i wsp. Postępowanie z substancjami genotoksycznymi stosowanymi w laboratorium : patrz tabela na stronie 28 dostępna na stronie internetowej INRS

Bibliografia

(en) JB Le Pecq i C. Paoletti „A New Fluorometric Method for RNA and DNA Determination” Analytic Biochemistry 1966; 17 (1): 100–7. PMID 6008008

Powiązane artykuły

Link zewnętrzny

(fr) Karta toksykologiczna INRS