Metoda Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment (SELEX) , we Francji systematyczna ewolucja ligandów przez wykładnicze wzbogacenie , jest metodą selekcji in vitro z kombinatorycznych bibliotek syntetycznych oligonukleotydów . Wybrane oligonukleotydy są zdolne do selektywnego wiązania danego liganda z wysokim i specyficznym powinowactwem. Technika ta, początkowo opracowana z użyciem RNA , została następnie uogólniona na oligonukleotydy DNA .
Technika SELEX wymaga biblioteki oligonukleotydów, której sekwencja na końcach 5 'i 3' jest znana i której sekwencja centralna jest losowa. Ten zbiór oligonukleotydów jest przygotowywany zgodnie z tą samą zasadą syntezy oligonukleotydów z tą różnicą, że podczas etapów wydłużania nukleotydów regionu centralnego, zamiast tylko jednej zasady, reagują cztery zasady. Technika ta umożliwia uzyskanie zbioru oligonukleotydów o różnych sekwencjach centralnych.
Zasada SELEX polega na wyborze oligonukleotydów, które wiążą się z najwyższym powinowactwem do celu. Kilka technik pozwala na oddzielenie cząsteczek, które rozpoznały cel od innych: chromatografia powinowactwa na żelu natywnym, separacja membranowa, a nawet użycie kulek magnetycznych. Następnie oligonukleotydy są oddzielane od cząsteczki będącej przedmiotem zainteresowania i są amplifikowane przez klonowanie lub PCR . Etap selekcji oligonukleotydów o wysokim powinowactwie do cząsteczki docelowej i etap amplifikacji są powtarzane kilkakrotnie w celu uzyskania oligonukleotydów o wysokim powinowactwie do celu. Wybrane oligonukleotydy nazywane są aptamerami . Technika SELEX zapewnia dobre wyniki i oligonukleotydy o bardzo niskiej stałej dysocjacji.
Technika SELEX umożliwia uzyskanie oligonukleotydów wykazujących powinowactwo do bardzo różnych celów ( jon , mała cząsteczka; białko , organelle, komórka). Otrzymane oligonukleotydy mają wysokie powinowactwo i wysoką specyficzność, dlatego są potencjalnie interesujące w diagnostyce i terapii chorób. Interakcje aptamer / ligand często porównuje się z reakcjami przeciwciało / antygen . Jednak zaletą stosowania tych cząsteczek zamiast przeciwciał jest brak wykorzystywania zwierząt do ich produkcji. Ponadto po zsekwencjonowaniu oligonukleotydy można łatwo odtworzyć na drodze syntezy chemicznej.