Bufor do elektroforezy

Elektroforezy buforu lub buforu migracja jest przewodząca bufor ( elektrolitów ) umieszczone w elektroforezie zbiorników w celu poprawy warunków migracji cząsteczek być oddzielone na skutek działania pola elektrycznego.

Nieruchomości

Bufory do elektroforezy są używane głównie w elektroforezie żelowej do oddzielania makrocząsteczek, takich jak kwas nukleinowy i biopolimery białek . Żel umieszcza się w buforze do poziomej elektroforezy żelowej lub przynajmniej na obu końcach żelu do pionowej elektroforezy żelowej. Bufor do elektroforezy zawiera zdysocjowane jony w roztworze wodnym. Zwiększają przewodność elektryczną roztworu. Siła jonowa buforu do elektroforezy określa ruchliwość jonów, szybkość migracji i warunki ogrzewania żelu.

Białko

W poniższej tabeli wymieniono typowe pary jonów buforowych stosowane do oczyszczania białek metodą elektroforezy.

Bufor pH Kompozycja
Tris-glicyna (TGS lub bufor Laemmli) 8,3 - 8,8 Tris (25 mM), glicyna (192 mM) i SDS (0,1% w / v).
Tris-tricyna 8.24 TRIS (50 mM), trycyna (50 mM), EDTA (1 mM) i SDS (0,1% m / v)
Tris-MOPS 7.7 TRIS (50 mM), MOPS (50 mM), EDTA (1 mM) i SDS (0,1% m / v)
Tris-MES 7.3 TRIS (50 mM), MES (50 mM), EDTA (1 mM) i SDS (0,1% m / v)

Te bufory są używane do przeprowadzania, na przykład, elektroforezy na żelu poliakryloamidowym w obecności dodecylosiarczanu sodu (SDS-PAGE).

Kwasy nukleinowe

Podczas rozdzielania kwasów nukleinowych można stosować bufory wymienione w poniższej tabeli.

Bufor pH Kompozycja
TAE 8.0 Tris, kwas octowy i EDTA (1 mM)
TBE 8.0 Tris, kwas borowy i EDTA (1 mM)
TPE Tris (89 mM), kwas fosforowy (1,3% w / v) i EDTA (2 mM)
SB 8.0 Wodorotlenek sodu i kwas borowy
FUNT Wodorotlenek litu i kwas borowy

Te bufory są używane na przykład do przeprowadzania elektroforezy w żelu agarozowym i elektroforezy kapilarnej .

Bibliografia

  1. Elektroforeza białek i kwasów nukleinowych
  2. H. Schägger: Tricine-SDS-PAGE. W: protokoły przyrody. Band 1, Nummer 1, 2006, S. 16–22, DOI : 10,1038 / nprot.2006.4 , PMID 17406207 .
  3. Hermann Schägger, Gebhard von Jagow: Elektroforeza na żelu poliakryloamidowym z tricyną i sodem dodecylosiarczanu do rozdziału białek w zakresie od 1 do 100 kDa. W: Analytical Biochemistry . Bd. 166, 1987, S. 368–379, DOI : 10,1016 / 0003-2697 (87) 90587-2 , PMID 2449095 .
  4. Lela Buckingham: Diagnostyka molekularna. FA Davis, 2011, ( ISBN  978-0-803-62975-2 ) . S. 95.