Barwienia z tkanki biologicznej jest często niezbędne do identyfikacji. Niektóre przebarwienia są zgodne z życiem komórki, inne wymagają utrwalenia tkanek, a czasami wykonania skrawków histologicznych .
Aby umożliwić obserwację organelli pod mikroskopem świetlnym , stosuje się substancje barwiące .
Barwnik to wodny roztwór, który może być naładowany elektrycznie i który może trwale zabarwić substancję lub zestaw substancji.
Składa się z grupy chromoforów (kolor) i grupy auksochromowej (grupa zjonizowana): trwałe wiązanie na kwaśnych lub zasadowych grupach składników komórkowych (przy danym pH)
Charakterystyka:
Substancje kwasowe (naładowane -) w ogniwie są barwione barwnikiem zasadowym (naładowanym +), substancje zasadowe (naładowane +) w ogniwie barwnikiem kwaśnym (naładowanym -).
Ta kolorystyka zabarwia rodzaj wypełniacza. Widzimy morfologię komórki (kształt), położenie jądra i jego kształt. W ten sposób możemy określić liczbę typów komórek w tkance i strukturę tej tkanki (komórki połączone lub nie).
Reakcje redoks działające na makrocząsteczki dostarczają informacji o składzie chemicznym komórki. Przykłady:
Barwniki kwasowe mają dobre powinowactwo z substancjami zasadowymi, uwydatniają tkanki zasadowe , przez co mają właściwości kwasofilne .
Odsłaniają kwaśne, tak zwane tkanki zasadochłonne .
Wiele barwników wykorzystuje dwa barwniki: karminowo-zielony lub karminowo-zielony jod (technika podwójnego barwienia na różowo i zielono), eozyna - błękit metylenowy …
Niektóre tkaniny utrwalają srebro. Mówimy o strukturach argentafinowych lub o strukturze argentafilowej .
Podkreśla to tkanki chromafiny , takie jak rdzeń nadnerczy.
Opracowano kilka metod barwienia w celu ujawnienia pewnych struktur. Oto kilka z nich wymienionych w tabeli:
Kolorowanie | składniki | Cytoplazma | Kolagen | Elastyna | DNA | Inny | pH |
---|---|---|---|---|---|---|---|
Hematoksylina i eozyna | Hematoksylina i eozyna | czerwony różowy | czerwony różowy | czerwony | ciemny niebieski | ? | |
van Gieson | Hematoksylina , Acid Fuchsin i Picric Acid | żółty | czerwony | - (czasami różowy) | czarny | ? | |
Goldner | Hematoksylina , kwaśna fuksyna , Jasnozielony SF | czerwony | Zielony | - | czarny | ? | |
Elastica | Rezorcyna , fuksyna | fioletowo-brązowy | |||||
Azan | Azokarmin , błękit anilinowy | czerwony | niebieski | - (czasami różowy) | czerwony | ||
Ladewig | Pomarańczowy G , błękit metylenowy , kwaśna fuksyna , hematoksylina | czerwony ( pomarańczowy erytrocyt ) | niebieski | czarny | |||
Sudan III | Barwnik rozpuszczalny w tłuszczach | Tłuszcz w kolorze pomarańczowym | |||||
NIE | Hematoksylina , kwas nadjodowy , odczynnik Schiffa | niebieski | Polisacharydy : fioletowo-czerwone | ||||
Nissl | Tionina (lub toluidyna lub fiolet krezolowy ) | niebieski (z RE ) | niebieski | ||||
Bejca May-Grünwald Giemsa | Eozyna , błękit metylenowy i lazur metylenowy | czerwony w erytrocytach , niebieski w limfocytach | niebieski |
Chociaż nie są to bezpośrednio barwienia histologiczne, metody te mają na celu rozróżnienie kilku typów komórek. Używają również tych samych rodzajów barwników:
Aby umożliwić obserwację organelli za pomocą mikroskopii elektronowej , stosuje się metale ciężkie, takie jak ołów , uran lub wolfram . Obszary, które mają być pokolorowane, stają się ciemne, ponieważ niewiele elektronów udaje się przejść przez te metale.