Biacore

Biacore to nazwa handlowa urządzenia do pomiaru interakcji białko / białko lub białko / ligand i stałych powinowactwa. Technologia ta oparta jest na SPR (powierzchniowy rezonans plazmonów).

Szczegóły montażu

Tak zwane białko ligandowe jest połączone z chipem utworzonym z warstwy dekstranu umieszczonego na złotym płatku, który sam jest umieszczony na szklanej płytce. Ta warstwa jest umieszczona pomiędzy komórką mikroprzepływową a pryzmatem.

Drugie białko przechodzi do komórki mikroprzepływowej, a interakcja jest analizowana za pomocą sygnału SPR.

Zasada wykrywania

Wiązka spolaryzowanego światła monochromatycznego oświetla szklaną granicę między dwoma ośrodkami o różnych współczynnikach załamania , ponieważ kąt padania jest większy niż kąt graniczny (równy arcsin (n2 / n1)), całe światło jest odbijane, to jest zwane zjawiskiem całkowitego wewnętrznego odbicia. Nie ma wtedy załamania światła, ale składowa elektromagnetyczna światła, zanikająca fala rozchodzi się na odległość równą jej własnej długości, prostopadle do interfejsu.

Na poziomie złotego płatka znajdującego się na granicy między dwoma ośrodkami obserwuje się rezonans pomiędzy złotymi plazmonami a zanikającą falą, co skutkuje utratą energii świetlnej na poziomie wiązki odbitej na poziomie precyzyjnego kąta nazywany kątem rezonansu . Kąt ten jest wrażliwy na współczynnik załamania światła ośrodka, w którym rozchodzi się zanikająca fala.

Ciągły pomiar zmian kąta załamania prowadzony jest za pomocą mikro-refraktometru wytwarzającego sensorgram, który umożliwia śledzenie w czasie rzeczywistym wiązania cząsteczek wstrzykniętych do komórki mikroprzepływowej. Sygnał rezonansowy jest wyrażany w jednostkach rezonansu (RU) i odzwierciedla to, co jest obecne w danym momencie w komórce mikrofluidycznej.

Proces pomiaru

Zainteresowanie

Bibliografia