Badanie kliniczne STEP to nazwa nadana w badaniu klinicznym z szczepionką przeciwko HIV . Ta szczepionka, będąca własnością Merck & Co. , jest również znana pod nazwami MRKAd5 HIV-1 Gag / Pol / Nef, HVTN 502 i Merck V520 Protocol 023. Jest to randomizowane badanie fazy 2B z podwójnie ślepą próbą przeprowadzone w Ameryce pomiędzylistopad 2004 i Marzec 2007 (koniec zbierania danych w grudzień 2009).
Początkowym celem szczepionki Merck jest wywołanie komórkowej odpowiedzi immunologicznej przeciwko wirusowi HIV. Odbywa się to poprzez szczepienie pacjentów trzema wektorami wirusowymi opartymi na adenowirusie typu 5 (Ad5). Wybór tego typu wektora opiera się na wcześniejszych publikacjach wykazujących lepszą wydajność tych wektorów w porównaniu z plazmidami DNA, a nawet w porównaniu z wektorami pokswirusowymi . Dokładny skład szczepionki to w rzeczywistości równa (1: 1: 1) mieszanina trzech wektorów, po jednym dla Gag, Pol i Nef. Geny tych białek pochodzą odpowiednio ze szczepów HIV-1 CAM-1, IIIB i JR-FL.
Zastosowane tutaj wektory wirusowe są pozbawione działania replikacyjnego, ale mimo to zachowują moc zakaźną, aby móc zintegrować komórkę docelową. Teoretycznie, tak wstrzyknięty wirus jest wystarczająco funkcjonalny, aby móc przekierować maszynerię syntezy białek komórki, a tym samym zmusić ją do produkcji białek kodowanych w trzech różnych wektorach (Gag, Pol i Nef). Powinieneś wiedzieć, że w prawie wszystkich komórkach naszego ciała te trwale obecne fragmenty (peptydy) swoich normalnych białek wewnętrznych w receptorze na powierzchni komórki, głównym kompleksie zgodności tkankowej klasy 1 (MHC-1). System ten chroni organizm, umożliwiając rozpoznanie obcych lub nieprawidłowych białek znajdujących się w komórce przez uczestników układu odpornościowego ( limfocyty T ). Jednak komórki, które zostały „zainfekowane” przez wektory adenowirusowe, otrzymają fragmenty naturalnych białek HIV, naśladując w ten sposób infekcję tym wirusem. Zwykle układ odpornościowy powinien być w stanie ustalić odpowiedź CD8 + (cytotoksyczną) wspomaganą przez zapamiętywanie przy użyciu odpowiedzi CD4 + (limfocyty Th1). Ocena immunogenności tego typu podejścia w kontekście walki z HIV jest celem badania klinicznego STEP.
Początkowo 1500 osób (samce i samice mieszane) wybrano w oparciu o następujące kryteria: mieli się z wysokim ryzykiem zakażenia wirusem HIV, nie będąc początkowo osiągnięte, a ich miana surowicy od przeciwciał neutralizujących (nab) na typ 5 adenowirusów ( Ad5) musiała być mniejsza lub równa 200. Następnie wCzerwiec 2005, zespół STEP zdecydował uwzględnić 1500 innych pacjentów według tych samych kryteriów oceny ryzyka zakażenia, ale tym razem musieli oni mieć miano Nab Ad5 równe lub większe niż 200. Wybranych pacjentów podzielono losowo na dwóch główne grupy: szczepionka i placebo , te dwie grupy są stratyfikowane według miana Nab Ad5 w surowicy , ich płci i miejsca geograficznego, w którym odbywały się badania. Zgodnie z protokołem badania klinicznego, pacjentom podawano trzy dawki szczepionki, w 1., 4. i 26. tygodniu. Pacjenci zostali poinformowani, czy otrzymali szczepionkę, czy placebo.13 listopada 2007.
Większość wyników skuteczności dostępnych obecnie w badaniu klinicznym STEP odpowiada analizom przeprowadzonym na dzień 17 października 2007. Członkowie zespołu badawczego przeanalizowali odsetek nowych zakażeń wirusem HIV u pacjentów, którzy otrzymali szczepionkę i tych, którzy otrzymali placebo. Należy zauważyć, że ponieważ tylko jeden nowy przypadek HIV wystąpił u kobiet, analizy przeprowadzono tylko u mężczyzn. Jednym z powodów wczesnego przerwania badania jest wyższy wskaźnik zakażeń u osób zaszczepionych w porównaniu z grupą kontrolną. Rzeczywiście, u szczepionych wykryto 49 przypadków w porównaniu z 33 w grupie placebo. Dalsze analizy podzieliły te przypadki według różnych kryteriów. U mężczyzn z mianem Nab Ad5 mniejszym niż 200, przypadki HIV są prawie równe (28 u zaszczepionych w porównaniu z 24 w grupie kontrolnej). Jednak istnieje wyraźny wzrost wskaźnika zakażeń w podgrupie, w której Nab Ad5 jest większy niż 200 (21 u zaszczepionych w porównaniu z 9 w grupie kontrolnej). Ocena ryzyka ( HR) pokazuje ogólny wskaźnik ryzyka szczepień między 1,6 a 2,0. Ponadto analiza ta wykazuje wyraźną korelację między ryzykiem zakażenia a faktem początkowego posiadania miana Nab Ad5 wyższego niż 200 podczas obrzezania (HR między 4,2 a 4,8 w porównaniu z 0,6 - 0, 8 na <200 i nieobrzezany). Wszystkie te dowody doprowadziły do zarzucenia badania STEP z powodu nieskuteczności koncepcji.
Według czasopisma informacyjnego HVTN opublikowanego zimą 2009 r., Wkrótce pojawi się nowe badanie kliniczne oparte na prawie takich samych podstawach naukowych jak HVTN 502: szczepionka HVTN 505. Biorąc pod uwagę bezpośrednią korelację między poziomami przeciwciał d przeciwko adenowirusowi typu 5 i nieskuteczność szczepionki, twórcy tej nowej szczepionki skupili się na immunizacji wielokrotnymi dawkami plazmidów DNA, po których następowało zwiększenie odpowiedzi przez pojedynczą dawkę wektora Ad5; całość kodująca białka EnvA, EnvB, EnvC, Gag, Pol i Nef wirusa HIV.
Główne różnice między wektorami Ad5 z badania STEP i HVTN 505 polegają na metodach wybranych w celu uczynienia ich niereplikatywnymi oraz w ich rozmieszczeniu genów. Rzeczywiście, należy zauważyć, że region E4 jest całkowicie usunięty z HVTN 505, ale jest w pełni konserwowany w HVTN 502. Zgodnie z literaturą naukową, delecja tego regionu umożliwiłaby niższą ekspresję białek adenowirusa, a zatem , zwiększyłoby szybkość i czas trwania ekspresji transgenów (w tym przypadku docelowych białek HIV), co pozwoliłoby na większą immunogenność szczepionki. Odnośnie rozmieszczenia genów należy pamiętać, że szczepionka w badaniu STEP koduje białka Gag, Pol i Nef. Z kolei HVTN 505 zawiera białka Env (A, B i C), Gag, Pol i Nef w plazmidach DNA, ale wyklucza Nef z wektora Ad5. Odpowiedź immunologiczna poszukiwana przez tę szczepionkę będzie głównie skierowana przeciwko białkom Env i Gag, które mogą wywołać odpowiedź immunologiczną zarówno humoralną, jak i komórkową.
Wstępne wyniki tego nowego badania wyraźnie pokazują wzrost immunogenności przy użyciu systemu plazmid / wzmacniacz DNA z wektorem Ad5.